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                        如何規范的操作數字PCR儀?來看看萊尚生物科技是怎么做的吧

                        發布時間:2021-03-29瀏覽:298次
                          數字PCR儀是一種核酸分子一致定量技術。目前有三種方法用于核酸分子的定量,普通PCR半定量通過灰度進行定量;熒光定量PCR通過Ct(Cq)值進行相對定量;數字PCR是較新的定量技術,基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量,是一種一致定量的方法。主要采用微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據數字PCR 反應單元總數和有熒光信號的單元數以及樣品的稀釋倍系數,就可以得到樣本的最初拷貝數(濃度)。
                          注意:
                          1. Sock時,溫度應設為10℃,時間不要超過30分鐘。溫度過高,時間過長,易導致儀器的損壞。
                          2. 操作時,要嚴格遵守以上原則,及時記錄儀器運行的情況。
                          保養:
                          1.樣品池的清洗
                          先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體;打開PCR儀,設定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發去除。一般5~10min即可。
                          2.熱蓋的清洗
                          對于數字PCR儀,當有污染出現,而且這一污染并非來自樣品池時;或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔鏡干凈,無污物阻擋光路。
                          3.儀器外表面的清洗
                          清洗儀器的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果。選擇沒有腐蝕性的清洗劑對PCR儀的外表面進行清洗。
                          4.更換保險絲
                          先將PCR儀關機,拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀察是否恢復正常。
                          維修:
                          1.PCR儀器需要定期檢測,視制冷方式而定一般半年至少一次。
                          2.PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的,當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1~2℃時,可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。
                          3.PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當PCR儀的降溫過程超過60s,就應該檢查儀器的制冷系統,對風冷制冷的PCR儀要較徹底地清理反應底座的灰塵;對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。
                          4.一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時,不要輕易打開或調整數字PCR儀的電子控制部件,必要時要請專業人員修理或利用儀器電子線路詳細圖紙進行維修。

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